实验动物标识技术 Laboratory Animal Identification Techniques

      科学研究、临床前研究和药理学研究通常使用多种实验动物作为研究对象。因此，正确的动物标识是不可或缺的步骤。动物标识技术不仅有助于记录动物的信息，还促进了实验动物管理人员和研究人员之间的沟通。此外，标识系统有助于实验者遵循实验动物中心和研究方案的规定，因为在涉及实验动物的研究中，动物的安全和舒适性是首要考虑因素。

      一个标识系统应该至少包括研究者的姓名、动物的品系或品种、动物的年龄和来源。像上述基本信息通常保存在笼卡上。当进行集群饲养时，笼卡的用处很大。相反，当需要进行个体标识时，耳标、耳孔或纹身是首选的技术。标识方法的选择取决于饲养类型和所使用的研究方案。理想情况下，标识方法应该是经济的、永久的、对动物舒适度无不良影响的。以下是专门用于实验动物，尤其是啮齿动物的标识程序。

一、临时方法

      有一些简单的临时方法可以标记动物，如尾标法、剪毛法和染色法。马克笔标记可持续1-2天，剪毛可持续14天左右。这些方法的临时性超过了它们的好处，比如易于操作、对动物不会造成应激。

二、永久方法

1、耳缺刻/打耳孔

       耳缺刻或打耳孔是用于啮齿动物的一种最简单的动物标识技术。这种技术经济且易于操作，不需要任何特殊的培训或设备。这一技术的唯一需要的设备是一个耳孔冲孔器。有两种类型的冲孔器可用：拇指冲孔器和剪刀冲孔器。小鼠通常使用拇指冲孔器，而大鼠则可使用剪刀冲孔器。

1）耳廓冲孔的程序如下：

      首先，动物徒手或使用保定器保定。大鼠和小鼠可以在两周大后进行耳廓冲孔。选择预定冲孔的位置并标记。耳孔冲孔器被放置在预定的位置上，并迅速接合，以获得清晰而牢固的切口。通常，耳孔冲孔的编码范围为1-9，但如果要编码10-99，则“十位数”标在左耳上，而“个位数”标在右耳上。安全冲孔后，将动物放回笼子。

2）优点和限制：

优点：A) 耳廓冲孔法既经济又简便。它不需要专门的培训或设备。在进行该过程之前，不需要麻醉。B) 冲孔的耳廓组织可以提供DNA，利用聚合酶链反应（PCR）进行基因分型。

缺点：A) 由于伤口会愈合，数字在几周后会消失。B) 动物打架可能会造成相似的缺口，使个体编号难以辨认。

2、耳标

      耳标法也是一种简单且经济的动物标识技术。这种技术是永久性的，除非标签被移除或掉落。标签垂直放置在耳的基部，在耳软骨末端的远端。根据研究或实验室的要求，卡上的编号可以从数百到数千不等。

1）耳标的操作步骤如下：

      动物徒手保定。金属标签在拇指和食指之间抓住。耳标在耳根部一半处放置一个联结装置。注意：标签不应压迫耳道。紧压拇指和食指使标签联结。在贴好标签后，安全地将动物放回其笼子。

2）优缺点：

优点：耳标是一种经济而简便的动物标识程序。

缺点：A) 为了确保标签正确放置，需要局部麻醉。B) 在耳标插入处可能会造成感染。C) 耳标可能会脱落或被缠绕在笼子或网盖中。D) 不正确的标签放置可能会使耳廓折叠，可能导致动物发炎和不适。

3、纹身

       纹身是一种用于动物标识的永久技术。纹身设备包括一对携带有皮下注射器和针头的微型纹身镊子。它可以在身体部位上进行。然而，尾巴和爪垫是最合适的纹身部位，可见度良好。

1）纹身的程序如下：

       按照说明准备好纹身镊子和纹身膏。为了避免动物挣扎，应将动物徒手保定后麻醉。将带有27号针头的1ml注射器插入所选部位，注射纹身墨水标记动物。事后动物妥善放回其笼子。

2）优点和限制

       纹身是一种永久但可以承受的动物标识技术。动物3日龄以上即可使用该方法进行标记。缺点是需要麻醉，并且在深色皮肤的动物体上，纹身可能难以辨认。另外，使用的设备昂贵且操作需要培训。

4、电子可穿戴设备/微芯片

       皮下微芯片或可穿戴设备也用于动物标识。通常使用玻璃封装的无源微芯片。这些微芯片是生物惰性的，不需要任何电池进行充电。将约2毫米至13毫米的微芯片皮下植入是快速而简单的。读卡器生成低能耗的射频信号，激发芯片以传输其代码。这些代码被视作标识号。时间在接收端测量，以毫秒为单位。

1）微芯片的程序如下：

       动物被徒手保定，以避免挣扎和干扰。在肩胛骨之间的背部中间区域用70％乙醇擦拭。用皮下注射技术植入微芯片。通过读卡器评估接收设备上的信号，以确认植入的芯片。动物妥善放回其笼子。

2）优点和限制

优点：A) 预计错误或篡改的机会很小。B) 计算机驱动的系统允许研究人员在时间上扫描个体动物。

缺点：A) 使用的设备相当昂贵。对于较小的啮齿动物和新生鼠而言，芯片可能体积太大并且可能引起动物应激。

5、剪脚趾

       剪脚趾标记法需要移除远端指骨，会对动物产生一定程度的疼痛和应激的。

1）脚趾剪切的程序如下：

       操作前动物必须进行麻醉，麻醉后用碘伏清洁脚部。为了止血，实验者应该在剪切位置上放置无菌纱布按压止血。只允许剪去动物一个肢端的一个脚趾。

2）优点和限制

        剪脚趾法是一种简单而经济的动物标识方法。但其对动物造成的疼痛和伤害超过了其应用价值，该方法还可能造成动物的步态异常。

       动物标识系统的主要考虑因素是动物品系、物种、饲养方法（集体或个体）、皮肤和毛发颜色、研究的持续时间以及所进行的研究类型。标识方法理想情况下应该保持性长、在伦理上可以接受，并且具有一定生物相容性，排异反应小。